PCR實驗室

PCR實驗室

又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學技術，用于放大特定的DN***段，可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統，能迅速掌握患者體內的病毒含量，其精確度高達納米級別，精確檢測乙肝病毒在患者體內存在的數量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據。

PCR實驗室技術要求

標準PCR實驗室建設--設計要點

主體結構

目前實驗室的主體多為彩鋼板、鋁合金型材。室內所有陰角、陽角均采用鋁合金R50內圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。并且彩鋼板結構牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。

標準四區分隔和氣壓調節

將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增區及產物分析檢測區四個獨立的試驗區。整個區域有一個整體緩沖走廊。每個獨立試驗區設置有緩沖區，同時各區通過氣壓調節，使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產物對人員和環境的污染。

消毒

在四個實驗區和四個緩沖區頂部以及傳遞窗內部安裝紫外線燈，供消毒用。在試劑準備區還設置移動紫外線燈對實驗桌進行局部消毒。

機械連鎖不銹鋼傳遞窗

試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染（人物分流）。

地面

地面建議使用PVC卷材地面或自流平地面，整體性好。便于進行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少800mm*800mm）接縫需小于2mm。

PCR實驗室平面規劃圖

標準PCR實驗室建設--空氣流和壓差要求

▅ PCR實驗室的空氣流向必須嚴格按照試劑儲存和準備去→擴增區→擴增產物分析區空氣壓力逐漸遞減方式進行，防止擴增產物空氣氣流進入擴增前的區域。

▅ 空氣潔凈級別不同的的相鄰的房間之間中的靜壓差大于5帕，潔凈室（區）與室外大氣的靜壓差應大于10帕，應配備監測靜壓的設備，并定期監控。

標準PCR實驗室建設--潔凈裝修要求

▅ 潔凈室（區）的內表面應平整光滑、無裂縫、借口嚴密、無顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒，墻壁與地面的交界處宜成弧形或采取其他措施，以減少灰塵積聚和便于清潔。

▅ 潔凈室（區）內各種管道、燈具、風口以及其他公用設施，在設計和安裝時應考慮使用中避免出現不易清潔的部位。

▅ 潔凈室（區）的窗戶、天棚及進入室內的管道、風口、燈具與墻壁或天棚的連接部位均應密封。

PCR實驗室基本由五大結構組成，常見為：pcr走廊、準備區、制備區、擴增區和擴增分析區。

▅ 準備區

實驗所需試劑的準備工作，分裝等，由傳遞窗運送至制備區，嚴謹走人員通道。

▅ 制備區

主要進行樣品等保存，rna\dna的提取、貯存和其加入至擴增反應管和測定rna\dna的合成。

▅ 擴增區

dna的擴增，以制備的dna模版和合成的cDNA的加入和主板反應混合液制備成反應混合液等也可在擴增區內進行，在巢式pcr測定中，通常在第一輪擴增后必須打開反應管，因此巢式擴增有較高等污染危害性，第二次加樣必須在本區完成。

▅ 擴增分析

主要用來做擴增產物的測定，本區是主要的擴增產物污染來源，因此必須主意避免通過本區的物品或者工作服將擴增產物帶出。